ONPG CAS: 369-07-3 98,0% Min zuria hauts zuritik
| Katalogo zenbakia | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| produktuaren izena | ONPG (2-nitrofenil-beta-D-galaktopiranosidoa) |
| Formula molekularra | C12H15NO8 |
| Pisu Molekularra | 301.25 |
| Biltegiratze xehetasunak | 2 eta 8 °C artean |
| Tarifa Kode Harmonizatua | 29400000 |
Produktuaren zehaztapena
| Garbitasuna (HPLC) | Min.%98,0 |
| Itxura | Hauts zuritik zuria |
| Irtenbidea(%1 Uretan) | Disoluzio argia, koloregabea edo apur bat horia |
| Ur edukia(Karl Fisher) | Max.%0,5 |
| Errotazio optiko espezifikoa [α]D20(c=1, H2O) | -65,0 °C eta -73,0 °C artean |
ONPG probari buruzko eztabaida (β-galaktosidasa proba)
Azkenaldian sarritan planteatu dira galderak: 1. Zergatik erabil daiteke ONPG proba laktosaren hartzidura atzeratua bereizteko?2. Zergatik dio arau nazionalak beharrezkoa dela ONPG probarako sodio kloruroaren % 3ko burdina trisakaridoa (edo burdina trisakaridoa) erabiltzea?3. Vibrio parahaemolyticus-entzat, OPNG proba egiterakoan, zergatik gehitu behar da toluenoa tantaka estandarren arabera?Zein da funtzioa?
Gure enpresak informazio asko berrikusi, laburtu eta zurekin partekatu du jarraian:
Printzipioa: ONPGren txinatar izena o-nitrobenzene-β-D-galactopyranoside da.ONPG galaktosa eta o-nitrofenol horia (ONP) hidroliza daiteke β-galaktosidasaren bidez, beraz, β-galaktosidasaren jarduera kultura-medioaren kolore-aldaketaren bidez detektatu daiteke.
Laktosa mikroorganismo gehienek detektatu behar duten azukrea da.Bere metabolismoak bi entzima behar ditu, bata zelula permeasa da, laktosa zeluletan sartzen da permeasaren eraginez;bestea β-galaktosidasa da, laktosa galaktosa bihurtzen duena.Laktosa eta glukosa.β-galactosidasa ONPG-an ere zuzenean eragin dezake galaktosa eta o-nitrofenol horia (ONP) hidrolizatzeko.24 ordutan egin daiteke, baita laktosa atzeratutako hartzitzaileekin ere.Hori dela eta, 1. kultura agar okertik hartu eta zirkulu oso batean 36°C-tan 1-3h eta 24h-tan inokulatzearen behaketaren emaitzak azaltzen ditu.β-galaktosidasa sortzen bada, horia bihurtuko da 1-3 ordutan, halako entzimarik ez badago, 24 ordutan ez da kolorez aldatuko.
Aurreko bi entzimen arabera, mikroorganismoak kategoria hauetan bana daitezke:
1 laktosa hartzitzen duten (18-24 ordu) bakterio permeasa eta β-galaktosidasa P + G +;
2 Laktosa hartzitzaile atzeratuak (24 ordu baino gehiago behar dituzte) permeasarik gabe baina galaktosidasa dutenak: P- G+.
3 Permeasa eta galaktosidasa falta duten laktosik gabeko hartzitzaileak: P- G-.
ONPG proba laktosa-lag-hartzitzen duten bakterioak (P-G+) eta hartzitzen ez diren laktosa-bakterioak (PG-) bereizteko erabil daiteke, hala nola:
1 Bereizi laktosa hartzitzaile berantiarrak (P- G+) eta laktosa ez diren hartzitzaileak (P- G-).
(a) Salmonellatik (-) Citrobacter (+) eta Salmonella arizonae (+).
(b) Escherichia coli (+) Shigella sonnei-tik (-).
Zergatik egin zen ONPG saiakuntza gaueko kultura erabiliz % 3ko sodio kloruroaren trisakarido ferrikoan (burdin trisakaridoa)?Gure enpresak informazio asko kontsultatu du, baina ez dago adierazpen argirik.FDAren webgunean bakarrik idatzita dago: "Inokulatu azukre burdinazko agar-agar-oihaletan probatu beharreko kulturak eta inkubatu 18 orduz 37 °C-tan (edo beste tenperatura egoki batean, behar izanez gero). % laktosa ere erabil daiteke."esan nahi du: probako bakterioak burdina trisakaridoen medioan inokulatu eta 37 °C-tan hazi ziren 18 orduz.Laktosa % 1 duten agar nutrienteak (edo beste) euskarriak ere onargarriak dira.Horregatik, burdina trisakaridoaren medioak laktosa duela ondorioztatzen da.Gauean hazi ondoren, bakterioek β-galaktosidasa aktibo ona sortu dute.Horrelako bakterioak erabiliz, ONPG azkarrago deskonposatu daiteke β-galaktosidasa.Fenomeno esperimentala azkarragoa eta hobeto ageri da.Horrez gain, toluenoa tantaka gehitzea eta 5 minutuz ur-bainua β-galaktosidasa guztiz askatzeko dira.
