Produktuak

Fibroblasto orbitalen adipozito helduetan bereiztea eta gero ehun adiposoaren metaketa Graves-en orbitopatiaren (GO) progresioan ikusi da.Autofagia adipogenesian parte hartzen du, baina ezer gutxi dakigu autofagiak GOaren hastapenean eta progresioan duen eginkizunari buruz.Ikerketa honen helburua GOaren patogenian autofagiak duen eginkizuna ikertzea da. GO duten pazienteetatik eta subjektu normaletatik ateratako ehun adiposo/konektiboa orbitaleko esplanteak, baita fibroblasto orbital isolatuak ere aztertu ziren.Adipogenesia hidrogeno peroxidoarekin edo gabe euskarri bereizgarria erabiliz eragin zen, eta autofagia A1 bafilomicina eta Atg5-ren xede den ile-hornaren RNA (shRNA) erabiliz manipulatu zen.Autofagosomak mikroskopia elektronikoaren bidez identifikatu ziren.Autofagiarekin lotutako geneen adierazpena eta adipogenesiarekin erlazionatutako transkripzio-faktoreak denbora errealeko alderantzizko transkripzio-polimerasaren kate-erreakzioaren eta/edo Western blot analisiaren bidez aztertu ziren.Lipido-tanta metaketa Oil Red O tindaketaren bidez aztertu zen. Bakuolo autofagikoak ugariagoak ziren GO zeluletan ez-GO zeluletan baino (p<0,05).Autofagiarekin erlazionatutako geneen adierazpena nabarmen handiagoa izan zen GO ehunetan eta zeluletan GO ez-ko kideetan baino, hurrenez hurren.Interleukin-1β-k LC3-II, p62 eta Atg7 proteina handitu zituen GO zeluletan.Autofagosomaren metaketa adipogenesiaren 4. egunean erakutsi zen eta 10. egunean gutxitu zen, lipidoen tantaren eraketarekin batera.LC3 eta p62 proteinen adierazpena desberdindu eta 48 orduko epean handitu zen eta pixkanaka gutxitu zen 4. egunetik 10era. Bafilomycin A1 tratamenduak eta shRNA-ren Atg5-ren deuseztapenak lipidoen tanten metaketa inhibitu zuten eta markatzaile adipogenikoen adierazpena kendu zuten. Autofagia handitu zen GO ehunetan eta zeluletan. GO ez diren ehunak eta zelulak, autofagiak GO patogenian zeregina duela iradokitzen du.Autofagia manipulazioa GOren helburu terapeutikoa izan daiteke.