Produktuak

Interferentzia txikiko RNA (siRNA) emateko sistema berri bat garatu dugu polietileniminarekin (PEI) eta azido γ-poliglutamikoarekin (γ-PGA) konplexu ternario bat erabiliz, isilarazteko efektua eta zitotoxikotasunik ez zuena.PEI-rekin siRNA-ren konplexu bitarrak 73-102 nm-ko partikulen tamainakoak ziren gutxi gorabehera eta 45-52 mV ζ-potentzialean.SiRNA/PEI konplexuen isiltze-efektua areagotu egin zen PEI-ren gehikuntzarekin, eta 16 baino karga-erlazio handiagoa duten siRNA/PEI konplexuek luciferasa deuseztapen garrantzitsua erakutsi zuten saguaren koloneko kartzinoma-lerro batean luciferasa (Colon26/Luc zelulak) erregularki adierazten zuen zelula batean.Hala ere, zitotoxikotasun handia eta odol aglutinazioa ikusi ziren siRNA/Lipofectamine konplexuan eta siRNA/PEI16 konplexuan.Konplexu katioikoak konposatu anioniko batekin birkargatzea toxikotasun horiek gainditzeko metodo itxaropentsua zela jakinarazi zuten.Hori dela eta, siRNA-ren konplexu ternarioak PEIrekin (karga-erlazioa 16) prestatu genituen γ-PGA gehituz, zitotoxikotasuna murrizteko eta siRNA emateko.Espero zen bezala, ternario-konplexuen zitotoxikotasuna gutxitu egin zen γ-PGA edukiaren gehikuntzarekin, eta horrek konplexuen ζ-potentziala murriztu zuen.SiRNA/Lipofectamine konplexuaren pareko isiltze-efektu indartsua aurkitu zen ternario-konplexuetan, gainazal karga anionikoa duten γ-PGA barne.Kolon26/Luc zeluletan konplexu ternarioen txertatze handia fluoreszentzia mikrokopiarekin baieztatu zen.Transfektatutako gene exogeno baten deuseztapena lortu ondoren, B16-F10 zeluletan, glizeraldehido 3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH) etxeko etxeko gene endogeno baten deuseztapena bideratzeko konplexuak duen gaitasuna ebaluatu zen.Konplexu ternarioak (siRNA/PEI16/γ-PGA12 konplexuak) GAPDH knockdown efektu nabarmena erakutsi zuen.Horrela, siRNA emateko sistema erabilgarria garatu genuen.